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單抗:不易產(chǎn)生批次間差異,僅由一種抗體亞型組成(例如IgG1、IgG2、IgG3);只檢測(cè)抗原上的一個(gè)表位。
多抗:識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位,所得血清為異質(zhì)性抗體混合物,其親和力各有不同,多克隆抗體主要由IgG亞類組成。
抗體氨基酸測(cè)序:客戶只能提供抗體;抗體基因測(cè)序:客戶可以提供雜交瘤細(xì)胞。
親和力成熟是指機(jī)體正常存在的一種免疫功能狀態(tài)。在體液免疫中,再次應(yīng)答所產(chǎn)生抗體的平均親和力高于初次免疫應(yīng)答。這種現(xiàn)象稱為抗體親和力成熟。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),HEK293,pAB20系列(pTt5改造)
含有大于1*10^6個(gè)細(xì)胞,加保護(hù)液干冰運(yùn)輸;加充足的培養(yǎng)基,常溫運(yùn)輸。
可以
可以,我們的表達(dá)載體含有通用的恒定區(qū)。
血液樣品:為避免RNA降解,全血樣品取樣后建議立即提取,因此,不建議直接送全血樣品,可以送提取后的總RNA或者血液分離后的白細(xì)胞; PBMC細(xì)胞:10^6以上,樣品干冰運(yùn)輸,防止RNA降解;
B細(xì)胞:細(xì)胞量10^3以上,置于RNA later溶液干冰運(yùn)輸; 總RNA:濃度100ng/ul以上,大于20ul,樣品需要干冰運(yùn)輸,防止RNA降解。
客戶提供抗原:多抗制備的價(jià)格;我們制備抗原:抗原制備+抗體制備價(jià)格。
CPG作為免疫增強(qiáng)劑可以明顯提高血清抗體特異性效價(jià)。
多抗、單抗的制備是一個(gè)篩選的過(guò)程,通過(guò)測(cè)序得到抗體的序列后方可通過(guò)重組抗體表達(dá)來(lái)大量生產(chǎn)。
可以用NNk的一個(gè)混合物,也可以用Trimer引物構(gòu)建基因文庫(kù)。