CpG寡脫氧核苷酸（CpG ODNs）是一種具有免疫刺激作用的合成DNA序列，因其強大的免疫調節能力和廣泛的適用范圍而成為當前生物醫學研究中的熱點之一。

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泓迅CpG ODNs小課堂

1. 什么是CpG ODNs？

CpG ODN是人工合成的含有非甲基化的胞嘧啶鳥嘌呤二核苷酸（CpG）的寡脫氧核EUN的結構特征與免疫效應各有不同，一般分為A、B、C三類。

2. CpG ODNs有哪些類型？

根據化學結構和生物學活性，CpG ODNs 可分為 A、B 和 C 三種類型，不同類型的 CpG ODNs 的結構特點、功能和主要應用方向也各有不同。

A 類 CpG ODNs：A類以含有 PO 中心 CpG 的回文基序和 PS 修飾的 3’端 poly-G。功能上，它對B細胞活性較弱，但能夠活化 pDC 誘生大量IFN-α。

B 類CpG ODNs：B類是一種全硫代修飾的線性 CpG ODNs，是發現最早的原型 CpG ODNs。功能上，它對B細胞具有較強的免疫刺激活性，但活化 pDC 產生 IFN-α 分泌的效果微弱。

C 類 CpG ODNs：C 類結合 A 類與 B 類的結構特征，含有一個完整的 PS 主干和一個包含 CpG 的回文基序。功能上，它既能夠激活B細胞，又能活化 pDC 產生 IFN-α，但是其效果分別弱于單獨使用 A 類或 B 類 ODN。

3. CpG ODNs可應用于哪些領域?

生物醫學與癌癥治療：結合放療過程中，CpG ODNs能顯著增強抗腫瘤效果，并且促進樹突狀細胞的成熟和抗原加載。還有研究表明，利用聚酰胺胺樹枝狀大分子包裹磁性納米粒子作為CpG ODNs的載體，可以有效誘導乳腺癌細胞凋亡。

過敏性疾病及哮喘：CpG ODNs可以通過調節免疫反應從Th2向Th1偏移來抑制過敏反應，對于治療哮喘等過敏性疾病顯示出良好的前景。例如，在NC/Nga小鼠模型中，經皮膚施用CpG ODNs能夠顯著降低血清IgE水平，減少炎癥細胞浸潤，并觀察到了調節性T細胞的生成，這表明CpG ODNs可能成為一種有效的針對特應性皮炎的治療方法。

感染性疾?。篊pG ODNs作為佐劑用于疫苗開發或直接對抗某些病原體感染方面也有研究價值。比如，它們能夠增強非典型流感嗜血桿菌特異性粘膜IgA反應，在預防中耳炎方面具有潛在作用。

疫苗研發：將CpG ODNs與其他成分組合使用，可以極大地提高抗原特異性免疫應答，同時避免了單獨使用CpG ODNs可能導致的一些副作用。這種方法為開發新型合成疫苗提供了新的思路。

4. 購買CpG ODNs需要注意哪些參數？

CpG ODNs的類型，種屬特異性、純度、內毒素水平

5. CpG ODNs用什么溶解？

1. 無菌水
當實驗或治療對溶液的pH值和滲透壓要求不嚴格時，無菌水可以作為一種簡單的溶劑選擇。
在某些特定情況下，如NaCl含量超過10%的樣品，有研究表明可以使用無菌水稀釋，但這種情況并未被國家標準廣泛認可。
注意事項：
無菌水不存在對菌的保護作用，滲透壓可能導致菌吸水脹裂死亡，因此不適用于需要保護生物活性的場合。

2. 生理鹽水（NaCl溶液）
生理鹽水具有與人體細胞液相似的滲透壓，因此常用于需要維持細胞正常生理功能的實驗或治療中。在某些情況下，如需要補充體液或維持生理環境時，生理鹽水是理想的選擇。

注意事項：
生理鹽水雖然具有適宜的滲透壓，但缺乏調整pH值的能力。生理鹽水中的NaCl可能引起同離子效應，影響某些藥物的溶解。

3. PBS（磷酸鹽緩沖液）
PBS具有鹽平衡和可調整的適宜pH緩沖作用，是生物化學研究中廣泛使用的緩沖液。
對于需要保持生物活性、穩定pH值和滲透壓的物質，PBS是首選溶劑。PBS常用于稀釋有活性的生物制劑，如病毒、疫苗等。

注意事項：
雖然PBS具有廣泛的適用性，但某些生物活性物質可能需要更復雜的緩沖液來維持其最佳條件。大部分CpG ODNs可以在PBS溶液中溶解，有個別類型CpG ODNs不溶解。
在選擇溶劑時，應根據實驗或治療的具體需求以及物質的性質進行綜合考慮，確保所選溶劑能夠滿足實驗或治療的要求。

6. 溶解CpG ODNs時還需要注意什么

濃度：應根據實驗或治療的需要確定CpG ODNs的溶解濃度。濃度過高可能導致細胞毒性，而濃度過低則可能無法達到預期的生物效應。
溶解條件：在溶解CpG ODNs時，應避免劇烈攪拌或高溫條件，以免破壞其結構或生物活性。
儲存條件：溶解后的CpG ODNs溶液應儲存在適當的條件下（如低溫、避光等），以保持其穩定性和生物活性。

7. 貴司1mg的CpG可以分裝成100ug每管嗎？

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References:

1.Kayraklioglu Neslihan, Horuluoglu Begum, Klinman Dennis M.. CpG Oligonucleotides as Vaccine Adjuvants[J]. Methods in molecular biology,2020,51-85. doi:10.1007/978-1-0716-0872-2_4

2. Scheiermann Julia, Klinman Dennis M.. Clinical evaluation of CpG oligonucleotides as adjuvants for vaccines targeting infectious diseases and cancer. Vaccine,2014,32(48):6377-6389. doi:10.1016/j.vaccine.2014.06.065

3. Givens Brittany E, Geary Sean M, Salem Aliasger K. Nanoparticle-based CpG-oligonucleotide therapy for treating allergic asthma. Immunotherapy,2018,10(7):595-604. doi:10.2217/imt-2017-0142